| 目的 建立大鼠定量视神经损伤模型，详细介绍其制作方法。方法 健康Wistar大鼠90只，15只为正常对照组，只进行3%荧光金逆行标记视网膜神经节细胞；另75只为定量视神经损伤组，按损伤后存活时间不同分为1天组、3天组、7天组、15天组、30天组，每组15只。应用40g力的视神经夹在大鼠眼球后2mm处夹视神经9s,于处死前7天采用双上丘注射3%荧光金标记双眼视网膜神经节细胞。取眼球标本并分离视神经至视交叉。视网膜铺片做荧光照相，并输入计算机图象分析仪计数视网膜神经节细胞。将视神经沿其长轴做切片在电镜下观察。结果手术获取完整的大鼠眼球，并分离视神经至视交叉。RGC记数：正常对照组中，左眼195.76±36.12,右眼197.52±39.25;伤后1天左眼165.12±26.36,右眼191.21±35.26，t=5.125,p<0.05；伤后3天左眼152.26±25.12,右眼192.16±32.12,t=11.157,p<0.05；伤后7天左眼135.19±21.32,右眼189.26±26.16,t=12.216,p<0.05；伤后15天左眼123.96±27.19,191.76±25.29,t=13.152,p<0.05；伤后30天左眼105.75±22.26,右眼186.56±23.76,t=11.236,p<0.05。电镜观察随存活时间延长视神经损伤相应加重。结论 应用40g力视神经夹建立的定量视神经损伤动物模型是可行的，并可广泛应用于视神经损伤修复的研究中，完整标本的获取需要较为熟练的手术技巧。 |
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