| 目的：研究TGF-β1调节CTGF对永生化人角膜基质纤维细胞(THSF)增殖、细胞基质合成的影响,探讨JNK通路在TGF-β1调节CTGF过程中的作用。
方法: 培养THSF细胞，利用MTT法检测不同浓度的TGF-β1、CTGF刺激THSF后对细胞增殖的影响及JNK通路阻断剂（SP600125）对TGF-β1调节细胞增殖作用的影响。外源性TGF-β1刺激THSF细胞后,在不同时间点分别采用免疫荧光和Western blot技术检测磷酸化JNK(P-JNK)的表达。在加/不加SP600125预处理后的THSF中， TGF-β1或创伤刺激后,于各时间点观察各组细胞划伤的修复情况；24h后收集各组细胞，应用real-time RT-PCR技术检测CTGF、FN及α－SMA mRNA的表达, Western blot检测Ⅰ型胶原的合成。
结果：各浓度组的TGF-β1及CTGF均能够促进THSF细胞增殖，其中3ng/ml的TGF-β1，50 ng/ml的CTGF作用最明显，SP600125能够明显抑制TGF-β1促细胞增殖的作用。在TGF-β1刺激后, 免疫荧光和Western blot均检测到THSF中有明显的P-JNK蛋白表达，对照组呈弱表达。划伤刺激后，TGF-β1刺激组的细胞移行明显快于对照组，SP600125对细胞移行有明显抑制作用。在TGF-β1刺激24h后，CTGF、FN及α－SMA mRNA在各组中均有表达，其中创伤和TGF-β1刺激组表达最高， SP600125处理组表达明显降低；Ⅰ型胶原在TGF-β1、CTGF及创伤作用下表达明显增加，SP600125能够抑制其表达。
结论：TGF-β1和CTGF均能够促进创伤后THSF增殖、迁移和基质合成，TGF-β1和创伤通过JNK通路上调THSF细胞中CTGF的表达。
注：国家教育部基金资助（20030422060）
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