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烟曲霉菌对人角膜上皮细胞TLR2、TLR4表达的影响 |
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作者:赵杰 吴欣… 文章来源:250012 山东省济南市文化西路107号 山东大学齐鲁医院眼科 点击数:1063 更新时间:2007/5/29 18:09:37
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目的: 研究烟曲霉菌(AF)抗原刺激后,永生化人角膜上皮细胞(THCE)中Toll样受体(TLR)2和4表达的变化及相关信号通路。
方法: 采用自制的AF菌丝体和培养上清抗原,刺激THCE细胞,用MTT方法检测菌丝、上清抗原对THCE形态及增殖的影响;用Real-time PCR及Western blot检测不同时点THCE细胞TLR2和4的表达;用Western blot检测THCE细胞PIκBα的活化评价NF-κB的活化。
结果: 光镜下观察,上清抗原作用于THCE后,细胞数及细胞形态基本无变化;菌丝抗原作用于THCE后,细胞数目减少,细胞变圆,部分细胞脱落。MTT方法结果显示菌丝体抗原抑制人角膜上皮细胞生长(P<0.05),上清抗原促进人角膜上皮细胞生长(P<0.05)。Real-time PCR结果显示,上清抗原作用1h后,TLR2、TLR4的表达开始升高(P<0.05);菌丝抗原作用2h后,TLR2、TLR4表达开始升高(P<0.05)。Western blot结果显示上清抗原作用后,PIκB的表达在30min开始升高,2h最高,4h开始降低;TLR2的表达在30min开始升高,4h最高;TLR4的表达在1h开始升高,4h最高。菌丝体抗原作用后,PIκB的表达在2h最高,4h开始降低;TLR2的表达在2h最高,4h开始降低;TLR4的表达在1h开始升高,4h开始降低。
结论: TLR2和TLR4参与THCE对AF菌丝抗原及AF上清抗原的识别, NF-κB介导细胞下游炎性信号通路的传导。
注:国家自然科学基金项目(30571997)资助课题
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会议投稿录入:qiluoph 责任编辑:毛进 |
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